凋亡與鐵死亡的碰撞

欄目：最新研究動態(tài) 發(fā)布時間：2020-07-10
鐵死亡是鐵依賴的非凋亡形式的細(xì)胞死亡方式，涉及各種人類疾病。p53是一種腫瘤抑制因子，可被凋亡刺激蛋白刺激...

    鐵死亡是鐵依賴的非凋亡形式的細(xì)胞死亡方式，涉及各種人類疾病。p53是一種腫瘤抑制因子，可被凋亡刺激蛋白刺激，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和鐵死亡以應(yīng)對DNA損傷反應(yīng)。凋亡和鐵死亡的碰撞有此開始，各位看官別走開，這里很精彩。

思 路：

結(jié) 果：
1.體內(nèi)腸缺血/再灌注（I / R）誘導(dǎo)的急性肺損傷（ALI）促進(jìn)鐵死亡
    I / R誘導(dǎo)小鼠ALI，動脈血PaO2降低，肺含水量和BALF蛋白含量升高。肺部HE染色顯示，I / R持續(xù)時間延長，水腫、肺不張、壞死、肺泡和間質(zhì)發(fā)炎、出血和透明膜形成加劇，更多的膠原蛋白沉積，GSH百分比顯著降低，MDA和Fe2+百分比顯著升高。同時，鐵死亡標(biāo)志物FTH1和GPX4的表達(dá)減少，TF增加。

2.體內(nèi)Erastin誘導(dǎo)的鐵死亡促進(jìn)腸道I / R誘導(dǎo)ALI
    Erastin處理I / R小鼠顯著增加MDA、Fe2+含量和TF的蛋白質(zhì)/ mRNA水平，降低GSH百分比、FTH1和GPX4的蛋白質(zhì)/ mRNA水平。但這些作用鐵死亡抑制劑liproxstatin-1逆轉(zhuǎn)。肺組織病理分析顯示liproxstatin-1逆轉(zhuǎn)Erastin的加重病理功能。

3. p53促凋亡蛋白抑制劑（iASPP）敲低可促進(jìn)腸I / R誘導(dǎo)ALI
    iASPP在肺組織中的表達(dá)隨I / R持續(xù)時間增加。I / R60分鐘后，細(xì)胞核中iASPP蛋白增加減少，細(xì)胞質(zhì)中的含量增加。敲低iASPP可加重肺部病理，而過表達(dá)則逆轉(zhuǎn)這種效應(yīng)。這些表明，iASPP缺乏增加肺組織損傷的敏感性。

4. iASPP過表達(dá)抑制鐵死亡，而iASPP敲低促進(jìn)鐵死亡
    評估I / R后iASPP腺病毒轉(zhuǎn)染小鼠的鐵死亡水平，發(fā)現(xiàn)FTH1和GPX4表達(dá)升高，TF和ACSL4明顯降低，表明鐵死亡增加。敲低iASPP有相反效果，表明iASPP的表達(dá)對體內(nèi)ALI誘導(dǎo)的鐵死亡程度至關(guān)重要。

5. iASPP介導(dǎo)的腸I / R誘導(dǎo)ALI依賴于體內(nèi)的Nrf2信號傳導(dǎo)
    接下來，研究Nrf2缺乏是否會改變I / R對ALI的影響。iASPP過表達(dá)對Nrf2 mRNA表達(dá)無影響，但導(dǎo)致Nrf2蛋白水平升高，iASPP抑制降低Nrf2蛋白但不降低mRNA表達(dá)。這些數(shù)據(jù)表明iASPP誘導(dǎo)Nrf2積累，這種作用不在轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生。I / R 60分鐘后WT小鼠肺中iASPP和Nrf2蛋白增加，敲低 Nrf2降低iASPP水平。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)Nrf2-/-I / R小鼠病理加重，iASPP過表達(dá)減弱病理結(jié)果。肺組織免疫組化染色顯示I / R小鼠中較高的Nrf2和iASPP水平。這些表明iASPP是維持Nrf2穩(wěn)定性的關(guān)鍵，iASPP介導(dǎo)腸I / R誘導(dǎo)的ALI依賴于Nrf2信號傳導(dǎo)。

6. Nrf2-/-小鼠中腸I / R誘導(dǎo)的ALI增強(qiáng)鐵死亡
    Nrf2-/-小鼠中GSH百分比、，MDA和Fe2 +增加，檢測鐵死亡相關(guān)標(biāo)志物FTH1和GPX4 、TF、NQO-1、HO-1發(fā)現(xiàn)Nrf2-/-小鼠鐵死亡增加。

7. Nrf2缺乏會上調(diào)HIF-1α和TF，促進(jìn)I / R誘導(dǎo)的ALI
    肺組織病理評估顯示I / R和Nrf2-/-小鼠中出現(xiàn)驗證病理變化，在Nrf2-/-小鼠的BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高，這些效應(yīng)在Nrf2-/-IR中顯著增強(qiáng)。I / R小鼠中HIF-1α和TF的mRNA /蛋白表達(dá)升高，敲低Nrf2后表達(dá)更高。這些證明Nrf2表達(dá)對于體內(nèi)I / R誘導(dǎo)的ALI至關(guān)重要。

8. MLE-2細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)的ALI促進(jìn)鐵死亡
    MLE-2細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)導(dǎo)致GPX4和FTH1表達(dá)下降，而ACSL4和TF明顯增加，加入Estinin后效果更強(qiáng)，而加入liproxstatin-1逆轉(zhuǎn)Estinin效應(yīng)至單獨低氧處理組。

9. iASPP通過Nrf2 /HIF-1α/ TF途徑方式緩解ALI和鐵死亡
    低氧處理MLE-2細(xì)胞中iASPP、Nrf2和HIF-1α的蛋白質(zhì)水平增加，在敲低iASPP后降低，iASPP過表達(dá)細(xì)胞核中Nrf2水平增加。·si-Nrf2處理的MLE-2細(xì)胞HIF-1α的水平較高，而Nrf2和TF含量較低。細(xì)胞過表達(dá)iASPP后FTH1、HO-1、TF和NQO-1增加，GPX4減少，，但這些作用可被si-Nrf2逆轉(zhuǎn)。這些表明iASPP通過Nrf2 /HIF-1α/ TF途徑緩解了ALI和鐵死亡。