早期妊娠流產(chǎn)中蛻膜CD11c+CD8+ T細(xì)胞的富集及其免疫功能異常

   早期妊娠流產(chǎn)（EPL）與母胎免疫微環(huán)境失衡密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，CD11c+CD8+ T細(xì)胞（一種非經(jīng)典細(xì)胞毒性T細(xì)胞亞群）在EPL病例中顯著富集并活化。這些細(xì)胞通過分泌顆粒酶B、穿孔素、CD107a、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和干擾素-γ（IFN-γ）參與免疫紊亂，并抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲。此外，研究人員提出了一種基于母體血清中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子譜的有效早期預(yù)測模型，該血清樣本采集于胚胎移植后12-16天。功能實(shí)驗(yàn)表明，IFN-γ通過NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路誘導(dǎo)滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡，從而阻礙滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲。通過易流產(chǎn)小鼠模型及抗4-1BB抗體誘導(dǎo)的CD11c+CD8+ T細(xì)胞活化模型進(jìn)行的體內(nèi)驗(yàn)證，證實(shí)了胚胎吸收增加及滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤減少。這些發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了母胎界面處失調(diào)的CD11c+CD8+ T細(xì)胞在EPL中的作用，并提示其作為EPL管理生物標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)的潛在價(jià)值。本文于2025年7月發(fā)表于《Nature Communications》，IF 15.7。

??技術(shù)路線??

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1. 早孕期患者中蛻膜CD11c+CD8+ T細(xì)胞的富集

   為了了解早期妊娠中蛻膜免疫細(xì)胞的表型特征，研究人員分析了來自六個(gè)蛻膜樣本的CD45+免疫細(xì)胞的單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）數(shù)據(jù)集（GSE164449），其中包括三個(gè)來自健康對照組（HC）和三個(gè)來自EPL病例的樣本，采集時(shí)間為妊娠6-9周。分析結(jié)果顯示，CD8+ T細(xì)胞是胎盤中占主導(dǎo)地位的T細(xì)胞亞群（圖1A–C）。進(jìn)一步比較兩組CD8+ T細(xì)胞中差異表達(dá)基因（DEGs）的結(jié)果顯示，與HC組相比，EPL組中有142個(gè)基因顯著上調(diào)（P<0.05，log2FC>1），其中包括多個(gè)與維持正常妊娠密切相關(guān)的已知基因，如CCL2、CCR2、CXCL8、IFI27和TIGIT（圖1D）。其中，編碼CD11c的ITGAX基因在EPL組蛻膜CD8+ T細(xì)胞中的表達(dá)水平顯著高于HC組（圖1E）。此外，數(shù)據(jù)還顯示EPL組與HC組來源的CD11c+CD8+T細(xì)胞中與T細(xì)胞細(xì)胞毒性和干擾素信號傳導(dǎo)相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄水平存在差異，例如GZMB、PRF1和IL2RB（圖1F）。CD11c+CD8+T細(xì)胞亞群中的差異表達(dá)基因（DEGs）主要富集于與免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的信號通路（圖1G），這表明EPL患者的蛻膜CD11c+CD8+T細(xì)胞可能表現(xiàn)出高度活化和免疫破壞性的表型特征。

圖1：EPL患者蛻膜中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的富集

   為了確保單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）數(shù)據(jù)集的質(zhì)量，研究人員對數(shù)據(jù)集進(jìn)行了質(zhì)量控制篩選，最終獲得13,681個(gè)高質(zhì)量細(xì)胞，其中HC胎盤組織中5,608個(gè)細(xì)胞和EPL胎盤組織中8,073個(gè)細(xì)胞符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。主成分分析（PCA）肘部圖可視化顯示兩組細(xì)胞分布相似，證實(shí)樣本間無顯著批次差異。通過結(jié)合先前研究中確立的標(biāo)志物及機(jī)器注釋結(jié)果，研究人員在胎盤中捕獲了大多數(shù)免疫細(xì)胞類型，如t-SNE降維圖所示。對標(biāo)志基因表達(dá)的分析顯示，數(shù)據(jù)集中存在高表達(dá)CD3D和CD8A的T細(xì)胞。

   為驗(yàn)證單細(xì)胞RNA測序分析的結(jié)果，研究人員首先調(diào)查了HC組10名女性胎盤和外周血單核細(xì)胞（PBMC）中CD11c+CD8+T細(xì)胞的表達(dá)模式。胎盤和PBMC中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)分群策略如圖1H所示。初步結(jié)果表明，胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的比例顯著高于PBMC，表明妊娠期間胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞存在特異性富集（圖1I）。隨后，研究人員將胎盤樣本量擴(kuò)大至HC組18名女性和EPL組20名女性，確認(rèn)EPL組胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的頻率顯著高于HC組（11.22%±3.32% vs. 8.05%±2.69%，P＝0.003）（圖1J）。人胎盤組織免疫熒光染色顯示CD11c與CD8的共定位，進(jìn)一步證實(shí)EPL組胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的富集程度高于HC組（圖1K）。此外，與HC組相比，EPL患者外周血中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的頻率也顯著升高（7.74% ± 4.10% vs. 4.58% ± 1.96%，P = 0.041）。

2. CD11c+CD8+ T細(xì)胞在EPL中表現(xiàn)出高度活化和強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性特征

   為了進(jìn)一步探討CD11c+CD8+ T細(xì)胞在EPL中的作用，研究人員隨后基于CD45RA和CCR7的共表達(dá)評估了CD11c+CD8+ T細(xì)胞亞群的分布。CD45RA是初始T細(xì)胞的標(biāo)志物，而CCR7與T細(xì)胞向二級淋巴器官的遷移相關(guān)。有趣的是，與HC組相比，研究人員在EPL組的蛻膜CD11c+CD8+ T細(xì)胞中觀察到CCR7-CD45RA+效應(yīng)性CD8+ T細(xì)胞亞群的比例進(jìn)一步增加，而CCR7+ CD45RA+初始CD8+ T細(xì)胞亞群的比例則減少（圖2A）。此外，研究人員測定了激活和免疫耗竭標(biāo)志物HLA-DR、CD38和PD-1的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與HC組和EPL組中的CD11c-CD8+ T細(xì)胞相比，CD11c+CD8+ T細(xì)胞中HLA-DR和CD38的表達(dá)顯著更高（圖2B）。對于PD-1表達(dá)，研究人員發(fā)現(xiàn)EPL組的CD11c+CD8+T細(xì)胞和CD11c-CD8+T細(xì)胞中PD-1表達(dá)水平均顯著低于HC組（圖2C）。這些結(jié)果表明，作為效應(yīng)CD8+T細(xì)胞亞群的CD11c+CD8+T細(xì)胞在EPL患者中具有特異性富集和活化。

圖2：EPL患者子宮內(nèi)膜CD11c+CD8+ T細(xì)胞的表型和功能特征

   蛻膜CD8+ T細(xì)胞的細(xì)胞毒性功能和細(xì)胞因子分泌能力對妊娠的建立和維持具有重要影響?；谏鲜鰡渭?xì)胞RNA測序（scRNA-seq）分析表明，EPL患者的CD11c+CD8+ T細(xì)胞表現(xiàn)出與細(xì)胞毒性功能相關(guān)的轉(zhuǎn)錄表型，研究人員進(jìn)一步分析了來自3名健康捐獻(xiàn)者外周血中CD11c+CD8+ T細(xì)胞和CD11c-CD8+ T細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)（GSE183022）。分析結(jié)果顯示，與CD11c-CD8+ T細(xì)胞相比，CD11c+CD8+ T細(xì)胞中與T細(xì)胞活化和細(xì)胞毒性功能相關(guān)的基因（如CD38、GZMB和PRF1）的轉(zhuǎn)錄水平顯著更高。GO和KEGG分析顯示，CD11c+CD8+ T細(xì)胞在與免疫激活、細(xì)胞殺傷調(diào)節(jié)及細(xì)胞因子分泌相關(guān)的通路中顯著富集。這些結(jié)果表明，在轉(zhuǎn)錄水平上，CD11c+CD8+ T細(xì)胞代表了一種高度激活且多功能的效應(yīng)CD8+ T細(xì)胞亞群。

   因此，研究人員進(jìn)一步探索了HC組和EPL組蛻膜中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的功能特征。研究人員的結(jié)果顯示，蛻膜中CD11c+CD8+ T細(xì)胞與CD11c-CD8+ T細(xì)胞相比，表達(dá)更高水平的CD107a、顆粒酶B、穿孔素、TNF-α和IFN-γ的表達(dá)水平顯著高于CD11c-CD8+ T細(xì)胞（圖2D–G），表明CD11c+CD8+ T細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子分泌能力，這與轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果一致。研究人員還發(fā)現(xiàn)，與HC組相比，EPL組蛻膜的CD11c+CD8+ T細(xì)胞中CD107a、顆粒酶B、TNF-α和IFN-γ的表達(dá)水平顯著更高（圖2D–G）。在外周血中，僅EPL組的CD107a和IFN-γ水平與HC組相比顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著升高，進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了EPL中存在于胎盤的異常調(diào)節(jié)CD11c+CD8+ T細(xì)胞的功能特異性。

3. EPL中與CD11c+CD8+T細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子在早期妊娠母體血清中的變化

   基于上述發(fā)現(xiàn)，研究人員進(jìn)一步探討了來自32例HC和32例EPL患者的妊娠4–5周女性血清中與CD11c+CD8+T細(xì)胞功能相關(guān)的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子的表達(dá)。結(jié)果顯示EPL組與HC組在年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、不孕時(shí)間、不孕類型、抗穆勒管激素（AMH）、基礎(chǔ)促卵泡激素（FSH）、黃體生成素（LH）、雌二醇、孕酮、睪酮、催乳素、甲狀腺刺激激素（TSH）以及雙側(cè)竇卵泡計(jì)數(shù)（AFC）方面均無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異，表明兩組的基線特征具有可比性。小提琴圖顯示，EPL組中IL-17A、IFN-γ、穿孔素和顆粒酶的水平顯著高于HC組（P＜0.05）。此外，與HC組相比，IL-2、Fas、Granzyme A和Granzyme B的水平呈現(xiàn)上升趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（圖3A）。與CD11c+CD8+ T細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子譜在母體血清中的變化，可能通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)影響妊娠結(jié)局。

圖3：EPL患者早期妊娠血清中與免疫相關(guān)的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子表達(dá)譜的變化

   為了評估這些差異表達(dá)的血清生物標(biāo)志物在預(yù)測EPL發(fā)生中的潛在價(jià)值，研究人員繪制了每個(gè)生物標(biāo)志物的接收者操作特征（ROC）曲線（圖3B）。結(jié)果表明，這些血清生物標(biāo)志物具有中等預(yù)測價(jià)值，其曲線下面積（AUC）值如下： IL-2（0.58）、IL-4（0.50）、IL-6（0.54）、IL-10（0.58）、IL-17A（0.67）、IFN-γ（0.73）、Fas（0.58）、FasL（0.54）、顆粒酶A（0.50）、顆粒酶B（0.61）、穿孔素（0.75）和顆粒酶（0.65）。隨后，研究人員采用邏輯回歸（LR）對差異表達(dá)且在ROC曲線中表現(xiàn)良好的IL-17A、IFN-γ、穿孔素和顆粒酶進(jìn)行聯(lián)合建模分析，以預(yù)測EPL的發(fā)生（圖3C）。該聯(lián)合模型實(shí)現(xiàn)了AUC為0.95（95% CI：0.89-1.00，P＜0.0001），敏感性為81.25%，特異性為96.88%，表明該模型在預(yù)測EPL方面具有高度有效性。此外，研究人員利用機(jī)器學(xué)習(xí)評估了基于IL-17A、IFN-γ、穿孔素和顆粒酶的五種不同EPL預(yù)測模型，包括K最近鄰（KNN）、邏輯回歸（LR）、支持向量機(jī)（SVM）、隨機(jī)森林（RF）和極端梯度提升（XGBoost）。包含64個(gè)樣本的數(shù)據(jù)集按1:1比例隨機(jī)劃分為訓(xùn)練集（n＝32）和測試集（n＝32）。結(jié)果顯示，LR模型表現(xiàn)出強(qiáng)大的預(yù)測性能，在訓(xùn)練集上實(shí)現(xiàn)了AUC為0.95（95%置信區(qū)間：0.85-1.00，P＜0.0001），在測試集上實(shí)現(xiàn)了AUC為0.95（95%置信區(qū)間：0.81–1.00，P<0.0001）的AUC值。這進(jìn)一步支持了早期妊娠期母體血清中失調(diào)的細(xì)胞因子與與CD11c+CD8+ T細(xì)胞功能相關(guān)的細(xì)胞毒性分子之間的重要關(guān)聯(lián)，以及與EPL風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)。

4. 細(xì)胞毒性CD11c+CD8+T細(xì)胞通過NLRP3/Caspase-1/GSDMD介導(dǎo)的凋亡抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲

   為了進(jìn)一步探討CD11c+CD8+T細(xì)胞頻率和功能異常在EPL發(fā)生中的作用，研究人員首先從3名健康孕婦和3名EPL患者的胎盤組織中分選出CD8+T細(xì)胞。由于人類胎盤組織獲取受限，研究人員無法富集足夠的原代CD11c+CD8+ T細(xì)胞用于體外實(shí)驗(yàn)；因此，研究人員選擇分離CD8+ T細(xì)胞，并采用非接觸式共培養(yǎng)系統(tǒng)與HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)（圖4A）。蛻膜CD8+ T細(xì)胞和HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞以1:1的比例分別接種于細(xì)胞培養(yǎng)插入件的上室和下室，主要通過細(xì)胞因子等可溶性因子而非直接細(xì)胞接觸進(jìn)行相互作用。蛻膜中CD8+ T細(xì)胞的代表性流式細(xì)胞術(shù)門控圖如圖4B所示。鑒于測序分析顯示CD11c+CD8+ T細(xì)胞中與炎癥性細(xì)胞死亡相關(guān)的基因和通路顯著富集，研究人員檢測了共培養(yǎng)后HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，包括NLRP3、Caspase-1和GSDMD。結(jié)果顯示，EPL組蛻膜的CD8+ T細(xì)胞顯著誘導(dǎo)了滋養(yǎng)層細(xì)胞中NLRP3、Caspase-1和GSDMD的表達(dá)，而HC組來源的細(xì)胞則未見此現(xiàn)象。MCC950是一種強(qiáng)效且選擇性的NLRP3抑制劑，常用于抑制NLRP3炎癥小體激活介導(dǎo)的凋亡。值得注意的是，預(yù)處理MCC950可部分逆轉(zhuǎn)這種上調(diào)（圖4C）。功能實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明，EPL組蛻膜中CD8+ T細(xì)胞顯著抑制了滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲（圖4D）和胎盤類器官形成（圖4E），與空白對照組和HC組相比。胎盤類器官通過細(xì)胞角蛋白7（CK7）和F-肌動蛋白免疫熒光染色得到驗(yàn)證。類似地，MCC950預(yù)處理部分緩解了這些抑制作用。這些發(fā)現(xiàn)表明，NLRP3/Caspase-1/GSDMD介導(dǎo)的凋亡可能參與了觀察到的滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲減少。此外，對共培養(yǎng)的CD8+ T細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，EPL組的CD11c+ CD8+ T細(xì)胞頻率顯著升高，且與HC組相比，CD107a、顆粒酶B、穿孔素、IFN-γ和TNF-α的表達(dá)水平明顯升高。

圖4：EPL患者蛻膜細(xì)胞來源的CD11c+CD8+ T細(xì)胞通過NLRP3/Caspase-1/GSDMD介導(dǎo)的凋亡抑制絨毛膜細(xì)胞侵襲

   此外，研究人員進(jìn)一步通過流式細(xì)胞術(shù)從5名健康早期孕婦的外周血中分選出CD11c+CD8+T細(xì)胞和CD11c-CD8+T細(xì)胞群，并將其與HTR-8/SVneo永生化人滋養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng)。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，外周血CD11c+CD8+T細(xì)胞與HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng)后，顯著抑制了其侵襲能力，與CD11c-CD8+T細(xì)胞組相比。共培養(yǎng)后對兩組細(xì)胞群的流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示，CD11c+CD8+ T細(xì)胞主要富集于效應(yīng)細(xì)胞亞群，其HLA-DR表達(dá)增加、PD-1表達(dá)降低，且與CD11c-CD8+ T細(xì)胞相比，具有更強(qiáng)的分泌CD107a、顆粒酶B、穿孔素、IFN-γ和TNF-α的能力。

   IFN-γ已被報(bào)道可介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。為進(jìn)一步探討IFN-γ在CD11c+CD8+ T細(xì)胞誘導(dǎo)的滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡中的潛在介導(dǎo)作用，研究人員利用HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞和從早期妊娠絨毛組織中分離的原代EVT細(xì)胞，在體外模擬IFN-γ表達(dá)增加的影響。凋亡的證據(jù)通過凋亡相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、丙啶碘（PI）熒光染色和電子顯微鏡觀察進(jìn)行評估。研究人員的研究結(jié)果表明，用外源性重組IFN-γ處理HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞顯著增加了NLRP3、Caspase-1和GSDMD的表達(dá)（圖5A、B）。與對照組和MCC950預(yù)處理組相比，IFN-γ處理組顯示出顯著更高的PI陽性凋亡細(xì)胞比例（圖5C）。此外，Transwell侵襲和傷口愈合實(shí)驗(yàn)表明，與對照組和MCC950預(yù)處理組相比，IFN-γ處理組顯著抑制了滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲和遷移能力（圖5D、E）。此外，IFN-γ處理顯著減少了原代EVT的遷移和從組織塊絨毛尖端伸出的芽狀突起（圖5F）。

圖5：干擾素-γ通過激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路誘導(dǎo)凋亡，從而調(diào)節(jié)HTR-8/SVneo滋養(yǎng)層細(xì)胞的行為

   本研究中使用的原代EVT細(xì)胞的純化通過免疫熒光共染色與滋養(yǎng)層和EVT特異性標(biāo)志物CK7及人類白細(xì)胞抗原-G（HLA-G）進(jìn)行驗(yàn)證（圖6A）。隨后進(jìn)行的PI染色顯示，IFN-γ處理組中PI陽性EVT細(xì)胞的比例顯著高于對照組和MCC950預(yù)處理組（圖6B）。掃描電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，IFN-γ處理組的EVT細(xì)胞膜顯示出明顯的凋亡跡象，如破裂和穿孔（圖6C）。Transwell侵襲和傷口愈合實(shí)驗(yàn)也顯示，與對照組和MCC950預(yù)處理組相比，IFN-γ處理顯著抑制了EVT細(xì)胞的侵襲和遷移能力，與HTR-8/SVneo細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致（圖6D、E）。這些結(jié)果支持這樣一種觀點(diǎn)：EPL患者中富集的蛻膜 CD11c+CD8+ T細(xì)胞通過分泌細(xì)胞毒性分子和細(xì)胞因子（特別是IFN-γ）損害滋養(yǎng)層細(xì)胞的生物學(xué)行為，IFN-γ通過激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD介導(dǎo)的凋亡，最終導(dǎo)致妊娠丟失。

圖6：干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)人原代內(nèi)皮血管平滑肌細(xì)胞（EVT）發(fā)生凋亡，導(dǎo)致細(xì)胞侵襲和遷移能力下降

5. 4-1BB誘導(dǎo)的CD11c+CD8+ T細(xì)胞富集和活化導(dǎo)致小鼠流產(chǎn)

   為了證實(shí)CD11c+CD8+ T細(xì)胞在小鼠妊娠丟失中的作用，研究人員應(yīng)用了一個(gè)經(jīng)典的自發(fā)性流產(chǎn)小鼠模型。流產(chǎn)易感（AP）組由CBA/J雌性小鼠與DBA/2J雄性小鼠交配組成，而正常妊娠（NP）組則由CBA/J雌性小鼠與BALB/c雄性小鼠交配組成。作為腫瘤壞死因子受體超家族成員的免疫共刺激分子4-1BB，其表達(dá)于活化的CD8+ T細(xì)胞表面，并促進(jìn)CD11c+ CD8+ T細(xì)胞的增殖與分化，因此研究人員使用激動性抗4-1BB抗體誘導(dǎo)其活化。NP組的妊娠小鼠被注射這些抗體，以構(gòu)建一個(gè)CD11c+CD8+ T細(xì)胞表達(dá)上調(diào)和功能激活的模型（4-1BB組）（圖7A）。與NP組相比，AP組每只妊娠小鼠的活胎數(shù)量顯著減少，胚胎吸收率顯著升高，約為40%（圖7B–C），這一數(shù)值大致與該模型報(bào)道的流產(chǎn)率相當(dāng)。與AP組結(jié)果相似，4-1BB組與NP組相比也呈現(xiàn)顯著的胚胎吸收現(xiàn)象（圖7B–C）。此外，三組妊娠小鼠在E12.5時(shí)的體重?zé)o顯著差異（圖7D）。

圖7：小鼠胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的頻率和功能變化影響早期妊娠維持

   接下來，研究人員驗(yàn)證了流產(chǎn)小鼠模型中CD11c+CD8+T細(xì)胞的表型和功能變化。CD8+T細(xì)胞的門控策略被應(yīng)用于小鼠胎盤、脾臟和外周血。與研究人員在人類研究中的發(fā)現(xiàn)相似，與外周血和脾臟相比，NP小鼠的胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞顯著富集。與NP組相比，AP組和4-1BB組胎盤中CD11c+CD8+ T細(xì)胞的比例顯著更高（圖7E）。此外，與NP組相比，AP組和4-1BB組蛻膜CD11c+CD8+T細(xì)胞中CD69、CD107a、顆粒酶B、穿孔素和IFN-γ的表達(dá)水平不同程度升高（圖7F、G）。類似趨勢在外周血和脾臟組織中也有觀察到。這些結(jié)果進(jìn)一步表明，與EPL患者類似，自發(fā)流產(chǎn)小鼠中蛻膜CD11c+CD8+ T細(xì)胞的比例顯著增加。因此，這些細(xì)胞可能通過分泌特異性細(xì)胞毒性分子和細(xì)胞因子參與流產(chǎn)表型。此外，研究人員通過HE染色觀察了三組小鼠妊娠子宮的結(jié)構(gòu)，并通過免疫熒光染色分析了CK7+滋養(yǎng)層細(xì)胞向子宮胎盤浸潤的深度。結(jié)果顯示，與NP組相比，AP組和4-1BB組中CK7+滋養(yǎng)層細(xì)胞向胎盤浸潤的深度顯著降低（圖7H–I）。同時(shí)，胎盤組織的免疫熒光染色顯示，與NP組相比，AP組和4-1BB組中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平升高。這些發(fā)現(xiàn)表明，蛻膜中的CD11c+CD8+ T細(xì)胞通過干擾正常滋養(yǎng)層細(xì)胞行為導(dǎo)致妊娠丟失，強(qiáng)調(diào)了CD8+ T細(xì)胞與滋養(yǎng)層細(xì)胞在母胎界面上的相互作用在妊娠建立和維持中的重要性。

結(jié)論

   綜上所述，本研究揭示了EPL患者的胎盤和外周血中存在顯著活化和富集的細(xì)胞毒性CD11c+CD8+T細(xì)胞，這些細(xì)胞具有顯著抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲的潛力。作為亞群，CD11c+CD8+T細(xì)胞在妊娠早期母胎界面處功能發(fā)生改變，凸顯了其在EPL發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵作用。此外，研究人員基于與CD11c+CD8+ T細(xì)胞功能相關(guān)的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性分子，開發(fā)了一個(gè)強(qiáng)大的早期預(yù)測模型用于EPL。這些發(fā)現(xiàn)不僅為免疫療法提供了潛在靶點(diǎn)，還為EPL的發(fā)病機(jī)制研究和臨床精準(zhǔn)管理提供了新見解。

參考文獻(xiàn)：

Guo L, Guo A, Guo Y, Han S, Klein C, Chen ZJ, Yan J, Li Y. Enrichment of 蛻膜 CD11c?+?CD8?+?T cells with altered immune function in early pregnancy loss. Nat Commun. 2025 Jul 21;16(1):6678. doi: 10.1038/s41467-025-61992-8. PMID: 40691460; PMCID: PMC12279960.