腫瘤移植(TT)小鼠模型

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：熒光素酶基因標記的肝癌細胞(HepG2-luc)原位成瘤

模式動物品系SPF級Balb/c-nude 裸鼠，健康，雄性，5W，體重為18g~20g。

實驗分組：實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期：4-6 weeks

建模方法：目前在肝癌研究中多采用異體移植法將腫瘤細胞株注射到動物皮下形成局部瘤塊來構建移植瘤模型，相比機體原發(fā)性肝癌的形成及病理生理學變化仍有一定不同。通過向裸鼠肝臟注射肝癌細胞建立肝臟原位腫瘤模型，觀察其原位瘤成瘤的過程及狀態(tài)，能較好的模擬人體肝癌生長過程，為進一步抗肝癌免疫研究提供實驗動物模型。
1. 細胞株： 熒光素酶基因標記的人肝癌細胞株HepG2-luc。
2. 裸鼠肝臟原位成瘤模型的建立：
2.1 將標準條件下培養(yǎng)的處于對數(shù)生長期的HepG2-luc 細胞消化、離心，將所得的約 5×10 6 個細胞溶于 0.1 mL DMEM 培養(yǎng)液待用。
2.2 使用3%戊巴比妥鈉麻醉小鼠，待麻醉生效后，開腹暴露肝臟，用1ml胰島素注射針取準備好的細胞注射于裸鼠肝臟內(nèi)，用5-0絲線縫合傷口，活力碘消毒傷口，將裸鼠放在加熱墊上，待清醒后正常飲食飼養(yǎng)。
3. 熒光活體成像檢測：在成瘤后對裸鼠進行生物發(fā)光活體成像檢測，成像前使用3%戊巴比妥鈉麻醉小鼠，再通過腹腔注射3mg底物 luciferin，底物注射后20~30分鐘后進行生物發(fā)光活體成像檢測。

應用：HepG2-luc原位成瘤可用于研究肝癌轉移的過程