流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期

在現(xiàn)在的科研研究中，最初的研究基本上就是高通量篩選對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的差異表達(dá)基因，然后進(jìn)行大樣本的熒光定量PCR驗(yàn)證，確定差異基因與某種疾病的相關(guān)性。在之后的研究中，我們就要針對(duì)差異基因進(jìn)行干擾或過(guò)表達(dá)來(lái)進(jìn)行細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)。其中通過(guò)流式細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期的檢測(cè)是比較重要的方法。
一、服務(wù)介紹

流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）：

   就是對(duì)在高速流動(dòng)的鞘液包裹下的細(xì)胞、粒子進(jìn)行分析和分選的技術(shù)，這種細(xì)胞或粒子是經(jīng)過(guò)特異熒光標(biāo)記的。其特點(diǎn)是測(cè)量速度快，每秒鐘能測(cè)數(shù)千個(gè)乃至上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，且可進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量，另一特點(diǎn)是在分析的同時(shí)可把具有指定特征的細(xì)胞分離出來(lái)，這就是分選技術(shù)。

   重要參數(shù)：前向角散射（FSC）：前向角散射光的強(qiáng)度與細(xì)胞的大小有關(guān)，也就是說(shuō)，同一個(gè)細(xì)胞群體，F(xiàn)SC強(qiáng)的，其細(xì)胞大一些，而FSC弱的，其細(xì)胞小一些。側(cè)向角散射（SSC）：側(cè)向角散射又稱(chēng)90°散射或大角散射。側(cè)向角散射光對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感，對(duì)胞內(nèi)較大的顆粒也會(huì)有反應(yīng)。所以，側(cè)向角散射光的強(qiáng)弱可反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒的性質(zhì)。熒光信號(hào)（FL）：是細(xì)胞或細(xì)胞上的熒光染料被激光激發(fā)后發(fā)射出的熒光，不同的熒光染料其發(fā)射波長(zhǎng)不同。通過(guò)熒光強(qiáng)度可將同一個(gè)細(xì)胞群體中的有熒光標(biāo)記的細(xì)胞與無(wú)熒光標(biāo)記的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)，也就是我們通常所說(shuō)的陽(yáng)性細(xì)胞，也可以將陽(yáng)性細(xì)胞中的高FL的細(xì)胞與低FL的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)，也就是可以把強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞和弱陽(yáng)性細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。一般的流式細(xì)胞儀只裝有一個(gè)激光光源（488nm），可測(cè)出三個(gè)FL，即FL1、FL2、FL3。FL2-W指檢測(cè)熒光的脈沖寬度，區(qū)分單個(gè)細(xì)胞和雙聯(lián)體細(xì)胞FL2-H指脈沖高度，細(xì)胞單位面積上的熒光濃度FL2-A指脈沖面積，即細(xì)胞熒光總和。

二、服務(wù)流程

1、細(xì)胞培養(yǎng)
2、藥物處理
3、試劑處理
4、測(cè)定吸光度
5、撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
三、客戶(hù)提供
1、培養(yǎng)好的細(xì)胞（大于107）以及所需藥品。
2、藥物作用方式（藥物濃度、時(shí)間等）。
四、交付內(nèi)容