免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)，它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。
本公司為您提供全套免疫印跡(Western blotting)技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用高質(zhì)量試劑完成。
一、主要實驗步驟
1. 蛋白質(zhì)抽提
2. 蛋白質(zhì)定量：按BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作，測定樣品濃度。
3. 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE)：將準(zhǔn)備好的樣品液和生物素標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)分別上樣，標(biāo)準(zhǔn)加進(jìn)第一個孔中，電泳分離蛋白。
4. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜或PVDF膜：按Bio-Rad蛋白轉(zhuǎn)移裝置說明組裝濾紙凝膠纖維素夾層，30mA恒流條件下，4°C轉(zhuǎn)移過夜。
5. 膜的封閉和抗體孵育
6. 化學(xué)發(fā)光法檢測：將A和B兩種試劑等體積混合，均勻的加在膜上。數(shù)分鐘后使用化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀進(jìn)行曝光，拍照。
7. 數(shù)據(jù)分析：目的蛋白的灰度值除以內(nèi)參GAPDF的灰度值以校正誤差，所得結(jié)果代表某樣品的目的蛋白相對含量。
二、實驗周期
3-4周（樣本量大、指標(biāo)數(shù)多實驗周期會延長）
三、實驗收費
960元/膜（每張膜跑8樣本，客戶提供目的蛋白一抗）
四、實驗結(jié)果
1、 實驗報告，包括詳細(xì)的實驗方法所用儀器、試劑（word格式）
2、 目的蛋白及內(nèi)參條帶圖片（PNG格式）
3、 灰度值文件（Excel格式）
