利用IL-10R滯后性進(jìn)行吞噬逃避和腫瘤免疫恢復(fù)的細(xì)菌免疫療法

         細(xì)菌能夠穿透腫瘤組織，并在腫瘤微環(huán)境中引發(fā)免疫反應(yīng)。IL-10是一種免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，能夠抑制免疫反應(yīng)，而IL-10R是其受體。在腫瘤微環(huán)境中，IL-10的水平通常較高，可能與抗腫瘤免疫反應(yīng)的抑制有關(guān)。作者的研究聚焦于細(xì)菌免疫療法在癌癥治療中的潛力，特別是針對實(shí)體瘤微環(huán)境中細(xì)菌如何逃避免疫系統(tǒng)吞噬并激活抗腫瘤免疫反應(yīng)的機(jī)制。通過構(gòu)建一種工程化沙門氏菌（DB1），利用其在腫瘤組織中的選擇性增殖特性，揭示了IL-10R表達(dá)的滯后性在其中的關(guān)鍵作用。實(shí)驗(yàn)中，DB1在小鼠模型中顯著抑制了多種腫瘤的生長，提高了生存率，并且激活了腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞，尤其是腫瘤駐留記憶（TRM）CD8+ T細(xì)胞的擴(kuò)增和活性。研究發(fā)現(xiàn)，IL-10能夠誘導(dǎo)IL-10R的表達(dá)，并形成正反饋環(huán)路，使得腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞維持高水平的IL-10R表達(dá)，從而對IL-10產(chǎn)生持續(xù)響應(yīng)。此外，IL-10還能夠抑制腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞（TANs）的吞噬作用，保護(hù)細(xì)菌免受免疫系統(tǒng)清除?？傊?，作者的這一發(fā)現(xiàn)不僅為理解細(xì)菌免疫療法的雙重挑戰(zhàn)提供了新的視角，還為開發(fā)新型癌癥治療策略提供了理論基礎(chǔ)，有望通過調(diào)節(jié)IL-10R的表達(dá)來增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。該研究于2025年2月發(fā)表在《Cell》，IF 45.6分。

技術(shù)路線：

主要研究結(jié)果：

1 工程菌在實(shí)體瘤中選擇性增殖，以防止腫瘤生長、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移

         作者構(gòu)建了一株鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella enterica serovar Typhimurium）菌株，命名為設(shè)計(jì)菌株1（簡稱DB1），其包含一個(gè)基因回路，用于在有氧條件下抑制其生長，從而確保其在正常器官中的增殖受到限制。該菌的一個(gè)必需基因asd被置于氧抑制型啟動子Phypo后。為了增強(qiáng)其穿透腫瘤的能力，作者將單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）的溶血素O（LLO）基因置于由細(xì)胞內(nèi)信號誘導(dǎo)的啟動子PsseA后（圖1A）。作為對照，作者構(gòu)建了DB2，它與DB1相同，只是將DB1中的Phypo啟動子替換為天然的asd啟動子。與預(yù)期結(jié)果相符，這種基因回路導(dǎo)致DB1在有氧條件下出現(xiàn)顯著的細(xì)胞裂解（圖1B）。

         通過靜脈注射，作者將107個(gè)DB1細(xì)胞注入攜帶MB49膀胱腫瘤的C57BL/6小鼠體內(nèi)，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到約100 mm3時(shí)進(jìn)行注射。作者觀察到，在注射后24小時(shí)內(nèi)，DB1細(xì)胞在實(shí)體瘤的內(nèi)部區(qū)域形成了許多菌落（圖1C，紅色）。隨后，腫瘤內(nèi)的DB1數(shù)量在最初的12小時(shí)內(nèi)以大約0.4 h-1的速率呈指數(shù)增長，并在24小時(shí)達(dá)到飽和（圖1D）。

         接下來，作者在同種異體腫瘤小鼠模型中評估了DB1的治療效果。靜脈注射DB1顯著抑制了皮下MB49和B16-F10腫瘤的生長，以及由葡聚糖硫酸鈉（DSS）/偶氮甲烷（AOM）誘導(dǎo)的原位結(jié)腸腫瘤的生長，而用PBS處理的小鼠腫瘤則穩(wěn)定發(fā)展。值得注意的是，所有接受DB1治療的小鼠在整個(gè)觀察期內(nèi)都存活了下來（圖1E和1G）。

         有趣的是，當(dāng)通過皮下注射再次用B16-F10細(xì)胞挑戰(zhàn)時(shí)，接受DB1治療的B16-F10黑色素瘤小鼠表現(xiàn)出對腫瘤生長的抵抗力（圖1H），而與之年齡和性別相匹配的未接受治療的小鼠在1周內(nèi)就發(fā)展出黑色素瘤。相比之下，當(dāng)通過皮下注射MB49時(shí)，接受DB1治療的小鼠和未接受治療的小鼠以相似的速度發(fā)展出腫瘤，生長沒有顯著差異（圖1I）。此外，接受DB1治療的B16-F10黑色素瘤小鼠對B16-F10細(xì)胞通過靜脈注射進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移也表現(xiàn)出抵抗力（圖1J）。然而，在未接受治療的小鼠中，肺轉(zhuǎn)移導(dǎo)致肺重量增加（圖1J）。這些發(fā)現(xiàn)表明，DB1在治療的小鼠中誘導(dǎo)了抗原特異性的免疫記憶，從而防止了腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

圖1：DB1在實(shí)體瘤中選擇性增殖并抑制其生長和復(fù)發(fā)

2 DB1治療通過IL-10信號通路誘導(dǎo)腫瘤內(nèi)預(yù)先存在的CD8+ T細(xì)胞的局部再激活和擴(kuò)增

         為了剖析治療性免疫反應(yīng)，作者生成了減毒的DB7（ΔmsbB）和DB8（ΔlppAB）突變株，作為DB1治療效果的陰性對照。msbB基因編碼脂質(zhì)A乙酰轉(zhuǎn)移酶，而lppA和lppB基因分別編碼Braun脂蛋白，在DB7和DB8中分別被敲除。隨后，作者對MB49腫瘤中的免疫特征進(jìn)行了表征，重點(diǎn)關(guān)注CD4+和CD8+ T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞（DCs）。

         作者觀察到，通過抗CD8抗體耗竭CD8+ T細(xì)胞會消除DB1的抗腫瘤效果，表現(xiàn)為腫瘤生長增加，而CD4+ T細(xì)胞的耗竭則無此影響，這證實(shí)了CD8+ T細(xì)胞在DB1介導(dǎo)的腫瘤治療中的關(guān)鍵作用（圖2A）。進(jìn)一步在DB1治療前后進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq），以檢查腫瘤浸潤性CD8+ T細(xì)胞的激活和細(xì)胞毒性潛力。DB1治療增強(qiáng)了CD8+ T細(xì)胞的激活，表現(xiàn)為與對照組相比更高的激活評分（圖2B和2C），與CD8+ T細(xì)胞激活和細(xì)胞毒性相關(guān)的差異表達(dá)基因在圖2D中突出顯示。這些結(jié)果表明，DB1的治療效果依賴于增強(qiáng)腫瘤浸潤性CD8+ T細(xì)胞的細(xì)胞毒性。

         經(jīng)典的適應(yīng)性免疫激活過程通常需要4-7天才能達(dá)到效應(yīng)功能的起始階段。作者使用鞘氨醇-1-磷酸受體激動劑FTY720抑制T細(xì)胞從淋巴器官中逸出。結(jié)果顯示，FTY720治療有效地誘導(dǎo)了血液中T細(xì)胞的耗竭，但并未影響DB1的抗腫瘤效果（圖2E）。這些結(jié)果表明，DB1的效果并不依賴于外周和淋巴器官中循環(huán)T細(xì)胞的補(bǔ)充，而TME中預(yù)先存在的CD8+ T細(xì)胞提供了主要的再激活能力。

         腫瘤駐留記憶（TRM）CD8+ T細(xì)胞已被鑒定為CD8+腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TILs）的一個(gè)獨(dú)特亞群，它們駐留在TME中，能夠?qū)ζ涮禺愋钥乖a(chǎn)生快速免疫反應(yīng)。作者假設(shè)DB1治療主要增強(qiáng)TRM CD8+ T細(xì)胞，使其成為實(shí)體瘤中強(qiáng)大的癌細(xì)胞殺手。（本研究中提到的類似TRM的CD8+ T細(xì)胞是CD62L?CD69+ CD8+ T細(xì)胞）。作者發(fā)現(xiàn)，在皮下MB49腫瘤發(fā)展過程中，腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞群體中類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的比例逐漸增加，并在腫瘤接種后第14天達(dá)到約70%（圖2F）。在接受DB1治療后，類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的比例在接下來的2周內(nèi)持續(xù)上升，接近100%，并且與PBS處理相比，產(chǎn)生IFN-γ的類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的頻率增加了約3.5倍（圖2G）。此外，作者還證明了DB1治療特異性地激活了B16-OVA腫瘤中腫瘤內(nèi)卵清蛋白（OVA）特異性的類似TRM的CD8+ T細(xì)胞（圖2H）。這些數(shù)據(jù)共同表明，DB1持續(xù)促進(jìn)類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的擴(kuò)增和激活，這是限制它們所駐留腫瘤生長的主要因素。

         作者觀察到，DB1治療誘導(dǎo)了PD-1+TIM-3+或PD-1hi類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的顯著擴(kuò)增，這些細(xì)胞在感染后第3天達(dá)到峰值。隨后，這些細(xì)胞的比例在接下來的幾天內(nèi)逐漸下降，形成了一個(gè)獨(dú)特的鐘形動態(tài)模式（圖2I和S2I）。這些發(fā)現(xiàn)表明，DB1治療不僅維持了激活，還誘導(dǎo)了PD-1+TIM-3+或PD-1hi類似TRM的CD8+ T細(xì)胞的擴(kuò)增。中和IL-10完全消除了DB1在MB49和B16-F10腫瘤中誘導(dǎo)的抗腫瘤效果（圖3A和3B）。與之相符的是，腫瘤內(nèi)IFN-γ+ CD8+ T細(xì)胞的數(shù)量大幅減少（圖3C）。

         此外，對于PD-1+TIM-3+或PD-1hi類似TRM的CD8+ T細(xì)胞，IL-10中和完全消除了DB1誘導(dǎo)的擴(kuò)增、細(xì)胞毒性效應(yīng)功能以及在感染后第3天增強(qiáng)的Ki67表達(dá)（圖3D-3G）。作者進(jìn)一步將從MB49腫瘤攜帶小鼠中分離的類似TRM的CD8+ T細(xì)胞在體外與IL-10刺激或不刺激進(jìn)行培養(yǎng)（圖3H）。結(jié)果顯示，IL-10直接擴(kuò)增了類似TRM的CD8+ T細(xì)胞（圖3I，左側(cè)），包括PD-1+TIM-3+類似TRM的CD8+ T細(xì)胞（圖3I，右側(cè)）。這種IL-10誘導(dǎo)的擴(kuò)增效應(yīng)可以通過抗IL-10R單克隆抗體逆轉(zhuǎn)（圖3I）。對于類似TRM的CD8+ T細(xì)胞，這種擴(kuò)增效應(yīng)僅在體外刺激的最初3天內(nèi)持續(xù)，之后無論是否存在IL-10，細(xì)胞數(shù)量均下降（圖3I）。這可能是由于它們在體外的存活能力較低。這些結(jié)果表明，DB1的再激活和擴(kuò)增效應(yīng)主要涉及IL-10信號通路。

圖2：DB1激活類似TRM的CD8+ T細(xì)胞并擴(kuò)增PD-1+TIM-3+類似TRM細(xì)胞

圖3：DB1通過IL-10重新激活CD8+腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞以抑制腫瘤生長

3 腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞上的IL-10R表達(dá)表現(xiàn)出滯后環(huán)

         在DB1治療之前，腫瘤中的IL-10水平比血液中的高10倍，而脾臟中的IL-10幾乎無法檢測到（圖4A）。在DB1給藥后，腫瘤內(nèi)的IL-10水平大約增加了10倍，在24小時(shí)內(nèi)達(dá)到3 ng/g，然后逐漸下降，并在3天后穩(wěn)定在1.5 ng/g（圖4B）。相比之下，血液中的IL-10濃度始終比腫瘤中的低10倍以上（圖4B），這意味著IL-10是在腫瘤局部產(chǎn)生的。此外，作者觀察到IL-10選擇性地增加了腫瘤中IFN-γ+ CD8+ T細(xì)胞的百分比，但在脾臟中沒有這種效果（圖4C）。

         IL-10受體（IL-10R）是IL-10的唯一受體，對于細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTLs）的激活至關(guān)重要。作者接下來評估了從腫瘤攜帶小鼠的腫瘤和各種內(nèi)臟器官中分離的CD8+ T細(xì)胞上的IL-10R表達(dá)。代表性流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示，在DB1治療之前，腫瘤中的CD8+ T細(xì)胞高度表達(dá)IL-10Rα亞單位（IL-10RA），而其他器官中的CD8+ T細(xì)胞則不表達(dá)（圖4D和4E）。

         鑒于腫瘤中IL-10水平的升高以及腫瘤浸潤性CD8+ T細(xì)胞上IL-10R的高表達(dá)，這種模式在脾臟中并未觀察到（圖4A和4D），作者假設(shè)IL-10可能有助于TME內(nèi)CD8+ T細(xì)胞上IL-10R表達(dá)的上調(diào)（圖4F）。為了驗(yàn)證這一假設(shè)，作者將原代CD8+ T細(xì)胞與不同濃度的IL-10一起孵育。IL-10以劑量依賴的方式誘導(dǎo)Il10ra和Il10rb的表達(dá)，閾值濃度約為3 ng/ml（圖4G）。染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）分析顯示，IL-10激活的STAT3直接結(jié)合到CD8+ T細(xì)胞中這兩個(gè)基因的啟動子上（圖4H）。這些結(jié)果表明，IL-10/IL-10R/STAT3信號軸形成了一個(gè)正反饋環(huán)，以增強(qiáng)Il10ra和Il10rb的表達(dá)。

         然而，在DB1治療之前，腫瘤中的基礎(chǔ)IL-10濃度僅為約0.3 ng/g（圖4A），即比體外觀察到的閾值低10倍以上（圖4G），而大多數(shù)腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞卻表達(dá)了高水平的IL-10RA（圖4E）和IL-10RB。作者想知道如此低水平的IL-10是否足以誘導(dǎo)IL-10RA和IL-10RB的表達(dá)，盡管體內(nèi)和體外的閾值不一定相同。為了解釋在腫瘤中低水平IL-10刺激下IL-10R的高表達(dá)，另一種可能是IL-10R表達(dá)的正反饋介導(dǎo)的滯后現(xiàn)象。在這種情況下，滯后意味著細(xì)胞群體的活性不僅取決于當(dāng)前的信號水平，還取決于細(xì)胞之前經(jīng)歷過的信號水平。作者發(fā)現(xiàn)如果IL-10R和STAT3之間的正反饋?zhàn)銐驈?qiáng)，細(xì)胞群體的平均IL-10R mRNA表達(dá)水平將隨著IL-10濃度的變化呈現(xiàn)出滯后環(huán)（圖4I，左）。與模型模擬一致（圖4I，左），重新刺激的原代CD8+ T細(xì)胞中Il10ra的平均表達(dá)（紅色線條和圓形；圖4I，右）顯著高于直接用相同濃度IL-10刺激的細(xì)胞（藍(lán)色線條和菱形；圖4I，右）。對于Il10rb的表達(dá)也觀察到了類似的滯后效應(yīng)（圖S4H）。這些結(jié)果表明，短暫暴露于高濃度IL-10可以誘導(dǎo)持續(xù)的細(xì)胞反應(yīng)。重要的是，高IL-10RA和低IL-10RA表達(dá)的細(xì)胞呈現(xiàn)雙峰分布（圖4J），表現(xiàn)出滯后行為，其中一部分細(xì)胞在暴露于一定閾值的IL-10后可以顯著上調(diào)IL-10RA，并在此后保持這種高表達(dá)。

         這些結(jié)果表明，TME中的IL-10水平可能在腫瘤進(jìn)展過程中上升。事實(shí)上，在B16-F10黑色素瘤模型中，IL-10水平在腫瘤形成早期（約5天）增加，達(dá)到峰值后下降，并在之后穩(wěn)定在一個(gè)相對較低的水平（圖4K）。這些發(fā)現(xiàn)有助于解釋腫瘤中CD8+ T細(xì)胞與其他器官中CD8+ T細(xì)胞上觀察到的不同IL-10R表達(dá)特征（圖4D、4E）。

         為了將小鼠模型中腫瘤浸潤性CD8+ T細(xì)胞上高IL-10R表達(dá)的發(fā)現(xiàn)擴(kuò)展到人類腫瘤，作者使用組織芯片分析了多種人類腫瘤類型的CD8+ T細(xì)胞。作者發(fā)現(xiàn)，在27種腫瘤類型中，有22種在腫瘤組織中IL-10Rhi CD8+ T細(xì)胞的頻率高于正常組織（圖5A）。圖5B展示了一個(gè)代表性圖像，顯示了CD8+ T細(xì)胞上的IL-10RA表達(dá)，并清晰標(biāo)注了相應(yīng)的細(xì)胞。為了進(jìn)一步證實(shí)這一點(diǎn)，作者從肝癌或膀胱癌患者中分離出CD8+ T細(xì)胞，并發(fā)現(xiàn)腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞中IL10RA的表達(dá)水平顯著高于從正常鄰近組織或外周血中分離的CD8+ T細(xì)胞（圖5C）。正如預(yù)期的那樣，人類IL-10能夠高效誘導(dǎo)這些癌癥患者腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞中細(xì)胞毒性基因的表達(dá)，但它未能激活從外周血或正常鄰近組織中分離的CD8+ T細(xì)胞（圖5D）。顯然，預(yù)先存在的IL-10R可能是人類腫瘤內(nèi)CTLs的一個(gè)普遍特征，而研究中發(fā)現(xiàn)的滯后介導(dǎo)的IL-10R維持可能是其潛在機(jī)制。

圖4：CD8+ T細(xì)胞中IL-10R表達(dá)的滯后現(xiàn)象

圖5：各種人類腫瘤中CD8+ T細(xì)胞上高IL-10R表達(dá)表明內(nèi)在IL-10R滯后的普遍機(jī)制

4 細(xì)菌增強(qiáng)IL-10Rhi腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-10

         接下來，作者試圖分析DB1給藥后TME中IL-10的細(xì)胞來源。為了進(jìn)一步驗(yàn)證TAMs和TANs的作用，作者分別使用抗CSF1R（CD115）和抗Gr-1抗體在小鼠中耗竭巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。使用抗CSF1R抗體耗竭巨噬細(xì)胞顯著削弱了DB1在MB49腫瘤模型（圖6A）和B16黑色素瘤模型中的抗腫瘤效果。通過使用Toll樣受體4（Tlr4）缺陷的骨髓（BM）嵌合小鼠模型（其中髓系細(xì)胞被Tlr4?/?細(xì)胞替代），作者發(fā)現(xiàn)DB1無法刺激TAMs產(chǎn)生IL-10（圖6B），并且在缺乏TLR4的情況下失去了抗腫瘤效果（圖6C）。相比之下，DB1在Tlr2?/? BM嵌合腫瘤模型小鼠中保留了其抗腫瘤效果（圖6D）。此前有報(bào)道稱，IL-10R部分參與了巨噬細(xì)胞中IL-10的產(chǎn)生。作者隨后通過體外IL-10RA阻斷分析了巨噬細(xì)胞的IL-10分泌情況。作者發(fā)現(xiàn)，如果阻斷它們的IL-10R，DB1誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-10的能力將顯著受損（圖6E），這表明DB1誘導(dǎo)的IL-10分泌不僅依賴于TLR4的接觸，還依賴于IL-10R的存在。其潛在機(jī)制需要進(jìn)一步研究。因此，推測IL-10R的滯后現(xiàn)象也適用于TAMs，以確保TME中IL-10R的預(yù)先存在，從而使TAMs在DB1穿透實(shí)體瘤時(shí)能夠產(chǎn)生IL-10。在TAMs和小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7中觀察到了Il10ra和Il10rb的滯后現(xiàn)象（圖6F）。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)表明TAMs在介導(dǎo)DB1的抗腫瘤效果中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，并通過TLR4和IL-10R介導(dǎo)的信號通路促進(jìn)TME中有益的IL-10產(chǎn)生。同樣，使用組織芯片分析多種人類腫瘤類型中TAMs上的IL-10RA水平，發(fā)現(xiàn)27種腫瘤類型中有24種在腫瘤組織中IL-10Rhi巨噬細(xì)胞的頻率高于正常組織（圖6G），這表明在臨床實(shí)踐中，細(xì)菌可以利用實(shí)體瘤中的IL-10Rhi巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-10，從而激活人類的IL-10Rhi CD8+ T細(xì)胞。

圖6：DB1刺激的TAMs產(chǎn)生IL-10以及TAMs中IL-10R的滯后現(xiàn)象

5 IL-10R滯后現(xiàn)象促進(jìn)細(xì)菌逃避TAN的吞噬作用

         為了研究腫瘤內(nèi)中性粒細(xì)胞與DB1之間的相互作用，作者對DB1和中性粒細(xì)胞的空間分布進(jìn)行了可視化。此前報(bào)道的中性粒細(xì)胞的環(huán)狀結(jié)構(gòu)明顯環(huán)繞著定殖在腫瘤核心的DB1細(xì)胞（圖7A，左側(cè)）。然而，這種環(huán)狀結(jié)構(gòu)形成背后的機(jī)制仍然不明。幾項(xiàng)先前的研究報(bào)告稱，IL-10的產(chǎn)生會損害中性粒細(xì)胞向細(xì)菌感染組織的募集。作者假設(shè)由DB1刺激產(chǎn)生的IL-10降低了中性粒細(xì)胞的遷移能力，從而使DB1能夠逃避中性粒細(xì)胞的吞噬作用，并促進(jìn)腫瘤中環(huán)狀結(jié)構(gòu)的形成。與預(yù)期相符，當(dāng)作者對小鼠進(jìn)行IL-10中和時(shí)，環(huán)狀結(jié)構(gòu)消失了（圖7A，右側(cè)）。通過體外中性粒細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了這一假設(shè)，在該實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)中性粒細(xì)胞向DB1遷移時(shí)，向培養(yǎng)基中添加IL-10會顯著減少中性粒細(xì)胞的遷移，而這種效應(yīng)可以通過IL-10R抗體消除（圖7B），這表明TANs上預(yù)先存在的IL-10R對于DB1在TME中的逃避至關(guān)重要。

         另外，TANs中也存在IL-10R滯后現(xiàn)象（圖7C）。作者進(jìn)一步使用組織芯片分析了來自不同類型人類腫瘤的腫瘤內(nèi)中性粒細(xì)胞上的IL-10RA水平，發(fā)現(xiàn)16種腫瘤類型中有11種在腫瘤組織中IL-10RAhi中性粒細(xì)胞的頻率高于其正常對應(yīng)組織（圖7D），這表明細(xì)菌可以利用實(shí)體瘤中的IL-10Rhi中性粒細(xì)胞，通過IL-10/IL-10R信號通路逃避它們的吞噬作用。

圖7：TANs的IL-10R滯后現(xiàn)象及中性粒細(xì)胞環(huán)的形成

結(jié)論：

       綜上所述，本研究揭示了DB1通過利用IL-10R的滯后性，既能夠逃避免疫系統(tǒng)的清除，又能夠激活抗腫瘤免疫反應(yīng)。這種機(jī)制為細(xì)菌免疫療法提供了一種新的理論基礎(chǔ)，推進(jìn)了對TME內(nèi)復(fù)雜相互作用的理解。

實(shí)驗(yàn)方法：

         小鼠腫瘤模型，流式，scRNA-seq，ATAC-seq，CUT&Tag-seq，細(xì)胞培養(yǎng)，ELISA，CTL，qPCR，ChIP-qPCR，免疫熒光

參考文獻(xiàn)：

         Chang Z, Guo X, Li X, Wang Y, Zang Z, Pei S, Lu W, Li Y, Huang JD, Xiao Y, Liu C. Bacterial immunotherapy leveraging IL-10R hysteresis for both phagocytosis evasion and tumor immunity revitalization. Cell. 2025 Feb 20:S0092-8674(25)00158-8. doi: 10.1016/j.cell.2025.02.002. Epub ahead of print. PMID: 40037354.