抗糖尿病PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮抑制前列腺癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)代謝重編程

         前列腺癌（PCa）和2型糖尿?。?span>T2D）常常共存，但它們之間的關(guān)系仍然不明確。一些研究表明T2D可能會(huì)降低PCa的風(fēng)險(xiǎn)，而另一些研究則報(bào)告了相反的結(jié)果。本研究旨在探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）激動(dòng)劑貝特類藥物、特斯格利他扎和吡格列酮對(duì)PCa腫瘤形成的影響。通過(guò)對(duì)患者數(shù)據(jù)集的分析，研究人員發(fā)現(xiàn)PPARG的高表達(dá)與晚期PCa和不良生存率相關(guān)。PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮和特斯格利他扎顯著降低了原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa衍生細(xì)胞的細(xì)胞增殖和PPARγ蛋白水平。蛋白質(zhì)組學(xué)分析識(shí)別了原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞之間在mTORC1和線粒體脂肪酸氧化（FAO）通路方面的內(nèi)在差異，這些差異進(jìn)一步被特斯格利他扎和吡格列酮破壞。此外，代謝組學(xué)、基于Seahorse Assay的代謝分析以及放射性示蹤劑攝取實(shí)驗(yàn)揭示了吡格列酮將原發(fā)性PCa細(xì)胞的代謝轉(zhuǎn)向糖酵解，并在轉(zhuǎn)移性細(xì)胞中增加FAO，降低線粒體ATP產(chǎn)生。此外，吡格列酮抑制了原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞的遷移，并在原發(fā)性PCa細(xì)胞中誘導(dǎo)上皮標(biāo)記物E-鈣粘蛋白的表達(dá)。在體內(nèi)，吡格列酮在轉(zhuǎn)移性PC3異種移植模型中減少了腫瘤生長(zhǎng)，增加了磷酸化AMPKα并降低了磷酸化mTOR水平。此外，與非糖尿病PCa患者相比，接受PPAR激動(dòng)劑治療的糖尿病PCa患者在接受根治性前列腺切除術(shù)后五到十年內(nèi)沒(méi)有生化復(fù)發(fā)。我們的研究結(jié)果表明，吡格列酮減少了PCa細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)了代謝和上皮變化，強(qiáng)調(diào)了重新利用代謝藥物用于PCa治療的潛力。該研究于2025年5月發(fā)表于《Molecular Cancer》上，影響因子27.7，題為“The anti-diabetic PPARγ agonist Pioglitazone inhibits cell proliferation and induces metabolic reprogramming in prostate cancer”。

技術(shù)路線

研究思路

1. PCa患者中PPARG高表達(dá)與生存率降低相關(guān)

         研究人員通過(guò)分析前列腺癌圖譜（Prostate Cancer Atlas）中的數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)與健康組織和原發(fā)性PCa患者相比，AR途徑獨(dú)立的PCa（ARPC）患者的PPARG表達(dá)顯著降低。然而，與健康患者相比，原發(fā)性PCa患者的PPARG表達(dá)顯著降低，但在ARPC中有所增加。進(jìn)一步分析TCGA-PRAD數(shù)據(jù)（包含333名患者的生存數(shù)據(jù)）顯示，PPARG高表達(dá)與原發(fā)性PCa患者生化復(fù)發(fā)（BCR）自由生存率顯著降低相關(guān)。相比之下，PPARA表達(dá)對(duì)生存無(wú)影響，而PPARD高表達(dá)與PCa患者改善的生存結(jié)果相關(guān)。因此，研究人員評(píng)估了PPARG高表達(dá)相關(guān)的不良生存結(jié)果是否受PCa腫瘤抑制因子如PTEN和STAT3的影響。結(jié)果表明，PPARG高表達(dá)患者的生存率降低與PTEN無(wú)關(guān)，但與STAT3的共缺失密切相關(guān)。

圖1 PPARG 高表達(dá)的 PCa 患者的生存概率降低

2. PPAR激動(dòng)劑抑制原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞的增殖

         為了評(píng)估PPAR激動(dòng)劑對(duì)PCa細(xì)胞活力的影響，研究人員通過(guò)resazurin實(shí)驗(yàn)測(cè)量了細(xì)胞的代謝活性。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，特斯格利他扎和吡格列酮顯著降低了22RV1和PC3細(xì)胞的細(xì)胞活力，而貝特類藥物對(duì)任何細(xì)胞系的細(xì)胞活力均無(wú)影響。此外，通過(guò)CyQuant實(shí)驗(yàn)定量細(xì)胞DNA含量，發(fā)現(xiàn)特斯格利他扎和吡格列酮顯著降低了兩種細(xì)胞系的細(xì)胞DNA含量，而貝特類藥物則無(wú)影響。此外，西方印跡分析顯示，隨著特斯格利他扎和吡格列酮濃度的增加，PC3細(xì)胞中的PPARγ蛋白水平降低，但AR表達(dá)在22RV1細(xì)胞中基本不受影響。此外，流式細(xì)胞儀分析顯示，PPAR激動(dòng)劑處理24至72小時(shí)并未誘導(dǎo)任何細(xì)胞系的細(xì)胞凋亡。

圖2 PPAR 激動(dòng)劑抑制原代 22RV1 和轉(zhuǎn)移性 PC3 細(xì)胞的細(xì)胞增殖

3. 蛋白質(zhì)組分析揭示原發(fā)性22RV1和轉(zhuǎn)移性PC3細(xì)胞中改變的代謝通路

         為了全面了解原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞（分別由22RV1和PC3細(xì)胞代表）的蛋白質(zhì)組景觀，研究人員在基礎(chǔ)培養(yǎng)條件下以及經(jīng)過(guò)貝特類藥物、特斯格利他扎和吡格列酮處理后對(duì)其蛋白質(zhì)組進(jìn)行了分析。研究人員首先定性比較了22RV1和PC3細(xì)胞的基礎(chǔ)蛋白質(zhì)組譜。研究人員發(fā)現(xiàn)，兩種細(xì)胞系共同表達(dá)3294種蛋白質(zhì)，其中22RV1細(xì)胞獨(dú)有312種蛋白質(zhì)，PC3細(xì)胞獨(dú)有2147種蛋白質(zhì)。對(duì)共同蛋白質(zhì)進(jìn)行富集分析顯示，兩種細(xì)胞系均富含Myc靶標(biāo)、氧化磷酸化（OXPHOS）和mTORC1信號(hào)通路等通路的蛋白質(zhì)。分析僅在22RV1細(xì)胞中鑒定的蛋白質(zhì)顯示，富集了OXPHOS和脂肪酸代謝通路。相比之下，僅在PC3細(xì)胞中鑒定的蛋白質(zhì)主要與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β信號(hào)通路相關(guān)。對(duì)3294種共享蛋白質(zhì)進(jìn)行比較統(tǒng)計(jì)分析顯示，超過(guò)20%的蛋白質(zhì)表達(dá)差異顯著（名義p≤0.05，log2倍數(shù)變化≤-1|≥1）。研究人員發(fā)現(xiàn)262種蛋白質(zhì)在22RV1細(xì)胞中表達(dá)量更高，而416種蛋白質(zhì)在PC3細(xì)胞中表達(dá)量更高。值得注意的是，如波形蛋白（VIM）、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）和己糖激酶1（HK1）等蛋白質(zhì)在PC3細(xì)胞中表達(dá)水平更高，而在22RV1細(xì)胞中則被下調(diào)。基因集富集分析（GSEA）顯示，與PC3細(xì)胞相比，22RV1細(xì)胞中“線粒體中的電子傳遞鏈（ETC）OXPHOS系統(tǒng)”通路被上調(diào)。相反，與活性氧（ROS）產(chǎn)生和mTORC1信號(hào)通路相關(guān)的通路在22RV1細(xì)胞中被下調(diào)，但在PC3細(xì)胞中被上調(diào)。

圖3 蛋白質(zhì)組分析揭示了原代 22RV1 和轉(zhuǎn)移性 PC3 細(xì)胞中代謝途徑的改變

4. PPAR激動(dòng)劑改變?cè)l(fā)性22RV1和轉(zhuǎn)移性PC3細(xì)胞中代謝通路相關(guān)蛋白的表達(dá)

         進(jìn)一步研究PPAR激動(dòng)劑對(duì)22RV1和PC3細(xì)胞蛋白質(zhì)組景觀的影響，研究人員發(fā)現(xiàn)顯著變化。在嚴(yán)格定性交集比較中，22RV1細(xì)胞中經(jīng)每種條件處理后共鑒定到3282種蛋白質(zhì)（圖4a）。在PC3細(xì)胞中，共鑒定到3481種蛋白質(zhì)（圖4b）。此外，還鑒定到僅在每種處理?xiàng)l件下存在的蛋白質(zhì)，表明兩種細(xì)胞系對(duì)每種藥物都有獨(dú)特的蛋白質(zhì)組反應(yīng)（圖4a、b）。比較PPAR激動(dòng)劑處理的22RV1細(xì)胞與對(duì)照組的差異表達(dá)蛋白（DEP）分析顯示，與PPAR激動(dòng)劑處理相關(guān)的脂肪酸合酶（FASN）、G6PD和HK1顯著上調(diào)，而波形蛋白（VIM）等蛋白質(zhì)則下調(diào)（p≤0.05，log2倍數(shù)變化≤-1|≥1）（圖4c）。在PC3細(xì)胞中，PPAR激動(dòng)劑處理的影響則不那么明顯，貝特類藥物的影響幾乎可以忽略不計(jì)（圖4d）。特斯格利他扎和吡格列酮處理顯著導(dǎo)致FASN、G6PD和HK1等蛋白質(zhì)下調(diào)（p≤0.05，log2倍數(shù)變化≤-1|≥1）（圖4d）。與對(duì)照組處理的22RV1細(xì)胞相比，74種蛋白質(zhì)在所有三種PPAR激動(dòng)劑處理下顯著下調(diào)，440種蛋白質(zhì)上調(diào)，同時(shí)還觀察到藥物特異性的調(diào)控效應(yīng)（圖4e，上圖）。相比之下，在PC3細(xì)胞中，僅2種蛋白質(zhì)在所有三種PPAR激動(dòng)劑處理下與對(duì)照組相比顯著下調(diào)，17種蛋白質(zhì)顯著上調(diào)，此外還有藥物特異性的調(diào)控效應(yīng)（圖4e，下圖）。利用GSEA評(píng)估PPAR激動(dòng)劑處理對(duì)兩種細(xì)胞系中代謝和信號(hào)通路的影響。根據(jù)HALLMARKS數(shù)據(jù)庫(kù)，22RV1細(xì)胞經(jīng)每種PPAR激動(dòng)劑處理后，Myc靶標(biāo)、脂肪生成、OXPHOS、mTORC1信號(hào)通路和脂肪酸代謝等通路顯著上調(diào)。相比之下，PC3細(xì)胞在特別是特斯格利他扎處理后，ROS產(chǎn)生、Myc靶標(biāo)v1和mTORC1信號(hào)通路等通路顯著下調(diào)（圖4f）。進(jìn)一步分析使用GSEA鑒定與mTORC1通路和糖酵解相關(guān)的領(lǐng)先邊緣蛋白質(zhì)。log2轉(zhuǎn)換的倍數(shù)變化顯示，每種PPAR激動(dòng)劑處理后，22RV1細(xì)胞中mTORC1通路的領(lǐng)先邊緣蛋白質(zhì)如G6PD或谷胱甘肽二硫化物還原酶（GSR）上調(diào)。相比之下，這些蛋白質(zhì)在PC3細(xì)胞中經(jīng)特斯格利他扎和吡格列酮處理后下調(diào)。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)，與PC3細(xì)胞相比，22RV1細(xì)胞中mTORC1通路相關(guān)蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)蛋白水平較低，表明這兩種細(xì)胞系之間這些蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)表達(dá)存在差異。PPAR激動(dòng)劑處理還導(dǎo)致22RV1細(xì)胞中糖酵解蛋白如蘋(píng)果酸酶2（ME2）或二氫硫辛酰胺脫氫酶（DLD）上調(diào)。相比之下，吡格列酮處理導(dǎo)致PC3細(xì)胞中這些蛋白質(zhì)下調(diào)。log2轉(zhuǎn)換的糖酵解相關(guān)領(lǐng)先邊緣蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)豐度顯示，PC3細(xì)胞中這些蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)水平高于22RV1細(xì)胞。

圖4 PPAR 激動(dòng)劑改變?cè)?span> 22RV1 和轉(zhuǎn)移性 PC3 細(xì)胞中參與代謝途徑的蛋白質(zhì)表達(dá)

5. PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮重新編程原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞的代謝，并在22RV1細(xì)胞中誘導(dǎo)上皮表型

         研究人員利用Seahorse Assay基礎(chǔ)代謝分析、核磁共振（NMR）非靶向代謝組學(xué)和放射性示蹤劑細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)探索了PPAR激動(dòng)劑（處理24小時(shí)，100μM，對(duì)照組為0.2%DMSO）對(duì)22RV1和PC3細(xì)胞的代謝影響（圖5a）。比較基礎(chǔ)氧氣消耗率（OCR）和細(xì)胞外酸化率（ECAR）的線粒體應(yīng)激測(cè)試結(jié)果顯示，22RV1細(xì)胞的OCR增加，表明其依賴于氧化磷酸化（OXPHOS）。相比之下，PC3細(xì)胞的ECAR更高，表明其更依賴于糖酵解（圖5b）。吡格列酮處理（50μM或100μM）22RV1細(xì)胞導(dǎo)致基礎(chǔ)和ATP合酶相關(guān)OCR降低，表明線粒體ATP產(chǎn)生減少，同時(shí)ECAR增加，表明代謝向糖酵解轉(zhuǎn)變（圖5c-e）。在PC3細(xì)胞中，特斯格利他扎和吡格列酮降低了基礎(chǔ)和ATP合酶相關(guān)OCR，但未改變ECAR（圖5f-h）。與上述數(shù)據(jù)一致，糖酵解應(yīng)激測(cè)試（在剝奪葡萄糖和丙酮酸75分鐘后進(jìn)行）顯示，吡格列酮處理增加了22RV1細(xì)胞的ECAR和糖酵解活性，同時(shí)降低了OCR（圖5i-k）。在PC3細(xì)胞中，糖酵解測(cè)試導(dǎo)致PPAR激動(dòng)劑處理后ECAR略有但不顯著降低，糖酵解減少，同時(shí)特斯格利他扎和吡格列酮也降低了OCR（圖5l-n）。為了支持這些發(fā)現(xiàn)，研究人員測(cè)量了[18F]氟脫氧葡萄糖（[18F]FDG）在22RV1和PC3細(xì)胞中的攝取。基線測(cè)量顯示PC3細(xì)胞的[18F]FDG攝取顯著高于22RV1細(xì)胞，支持了Seahorse實(shí)驗(yàn)的早期結(jié)果。此外，吡格列酮處理使22RV1細(xì)胞的[18F]FDG攝取呈上升趨勢(shì)（p=0.1411），而PC3細(xì)胞則不受影響。為了進(jìn)一步了解PPAR激動(dòng)劑誘導(dǎo)的代謝變化，研究人員對(duì)PPAR激動(dòng)劑處理的22RV1和PC3細(xì)胞進(jìn)行了NMR基礎(chǔ)非靶向代謝組學(xué)分析。應(yīng)用偏最小二乘判別分析（PLS-DA）模型，吡格列酮處理的樣本與對(duì)照組以及貝特類藥物和特斯格利他扎處理的樣本沿水平軸明顯分離，突出了吡格列酮對(duì)兩種細(xì)胞系代謝組的顯著影響。然而，特斯格利他扎處理主要導(dǎo)致與對(duì)照組在垂直軸上的分離，而貝特類藥物處理未導(dǎo)致與對(duì)照組的任何明顯分離（圖5o）。進(jìn)一步分析顯示，經(jīng)吡格列酮處理的PC3細(xì)胞中短鏈脂肪酸顯著減少，而在22RV1細(xì)胞中未觀察到此類變化（圖5p）。為了確定細(xì)胞在PPAR激動(dòng)劑處理時(shí)是否攝取更多脂肪酸，研究人員進(jìn)行了[18F]氟代-6-硫-十七烷酸（[18F]FTHA）和[11C]乙酸示蹤劑攝取實(shí)驗(yàn)。特別是在PC3細(xì)胞中，兩種示蹤劑的攝取顯著增加（圖5q）。盡管脂肪酸攝取增加，但在PC3細(xì)胞系中脂滴減少。在分子水平上，mTOR和5'AMP激活的蛋白激酶α（AMPKα）被認(rèn)為是癌癥細(xì)胞中代謝應(yīng)激和脂肪酸氧化（FAO）的中心調(diào)節(jié)因子，因?yàn)樗鼈兎謩e通過(guò)PI3K/Akt和AMPK/LKB1信號(hào)通路的磷酸化和激活。對(duì)PPAR激動(dòng)劑處理的22RV1和PC3細(xì)胞進(jìn)行西方印跡分析顯示，僅在22RV1細(xì)胞中磷酸化AMPKα（Thr172）降低。然而，吡格列酮降低了兩種細(xì)胞系中磷酸化mTOR（Ser2448）的水平（圖5r）。重要的是，這種代謝重編程與PPAR激動(dòng)劑處理的22RV1細(xì)胞中上皮標(biāo)記物E-鈣粘蛋白的上調(diào)同時(shí)發(fā)生。相比之下，PC3細(xì)胞中的間充質(zhì)標(biāo)記物VIM保持不變（圖5r）。

圖5 PPARγ激動(dòng)劑 Pioglitazone 重編程原代和轉(zhuǎn)移性 PCa 細(xì)胞代謝，并在 22RV1 細(xì)胞中誘導(dǎo)上皮表型

6. 吡格列酮抑制PCa細(xì)胞的遷移和轉(zhuǎn)移性PC3異種移植腫瘤的生長(zhǎng)

         在劃痕實(shí)驗(yàn)中，研究人員評(píng)估了PPAR激動(dòng)劑對(duì)原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性PCa細(xì)胞遷移的影響。吡格列酮顯著降低了22RV1細(xì)胞的相對(duì)傷口密度。同時(shí)，在轉(zhuǎn)移性PC3細(xì)胞中觀察到細(xì)胞遷移減少的趨勢(shì)（p=0.0689）（圖6a）。為了評(píng)估PPARγ激動(dòng)劑特斯格利他扎和吡格列酮在體內(nèi)的影響，研究人員進(jìn)行了PC3細(xì)胞的異種移植實(shí)驗(yàn)。將腫瘤負(fù)荷的NSG小鼠每天通過(guò)口服灌胃給予特斯格利他扎、吡格列酮和對(duì)照組處理14天（圖6b）。研究人員發(fā)現(xiàn)，從治療后的第6天開(kāi)始，吡格列酮顯著降低了腫瘤體積，而特斯格利他扎則沒(méi)有顯示出任何顯著影響（圖6c）。在終點(diǎn)測(cè)量時(shí)，吡格列酮處理的小鼠也顯示出腫瘤重量減少的趨勢(shì)（p=0.1599）。此外，IHC分析顯示，特斯格利他扎和吡格列酮處理的異種移植腫瘤中增殖標(biāo)記物Ki67無(wú)差異，僅在吡格列酮處理中凋亡標(biāo)記物裂解的半胱天冬酶3（CC3）略有增加（圖6d）。然而，特斯格利他扎和吡格列酮處理導(dǎo)致磷酸化AMPKα顯著增加，吡格列酮處理后磷酸化mTOR呈降低趨勢(shì)（p=0.0908），反映了細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果（圖6d，e）。為了評(píng)估這些發(fā)現(xiàn)的潛在臨床意義，研究人員最后調(diào)查了T2D與接受根治性前列腺切除術(shù)（RP）的PCa患者預(yù)后之間的關(guān)系。研究人員比較了非糖尿病PCa患者與接受T2D藥物治療的糖尿病PCa患者。KM分析比較這兩個(gè)患者隊(duì)列的BCR自由生存率并未得出任何顯著差異。然而，它表明非糖尿病PCa患者的平均風(fēng)險(xiǎn)比（HR）略有增加（HR=1.13），在RP后五到十年（圖6f）。對(duì)接受不同T2D治療（鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（SGLT-2）抑制劑、二甲雙胍、PPAR激動(dòng)劑、胰島素或DPP4加二甲雙胍）的糖尿病患者亞組分析顯示，與非糖尿病PCa患者相比，BCR自由生存率無(wú)顯著差異（圖6g）。令人驚訝的是，接受PPAR激動(dòng)劑治療的糖尿病PCa患者在RP后至數(shù)據(jù)獲取時(shí)沒(méi)有BCR。與非糖尿病PCa患者相比，這些患者的HR增加但不顯著（HR=3.14）。

圖6 吡格列酮抑制 PCa 細(xì)胞的細(xì)胞遷移和轉(zhuǎn)移性 PC3 異種移植腫瘤的生長(zhǎng)

討論

         關(guān)于PCa和T2D之間關(guān)系的研究結(jié)果存在矛盾，這使得我們對(duì)男性中這兩種疾病關(guān)系的理解變得復(fù)雜。研究表明，患有T2D的PCa患者可能受到PCa疾病進(jìn)展的保護(hù)，但當(dāng)T2D未得到有效治療時(shí)，死亡率往往更高。除了二甲雙胍和其他T2D藥物外，PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮被用作單一療法或與磺酰脲類、二甲雙胍或胰島素聯(lián)合用于T2D的治療。盡管吡格列酮被廣泛使用，但其與PCa風(fēng)險(xiǎn)之間的明確聯(lián)系仍然不明。本研究結(jié)果表明，PPARG在ARPC中高表達(dá)，并與不良生存結(jié)果相關(guān)。這些結(jié)果證實(shí)了早期的研究報(bào)告，即與良性上皮組織相比，PCa組織中PPARγ水平升高。研究人員還觀察到，PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮顯著降低了體外細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移性PC3異種移植腫瘤的生長(zhǎng)。這種效應(yīng)與PC3細(xì)胞中PPARγ蛋白水平的降低以及22RV1細(xì)胞中上皮表型的出現(xiàn)相關(guān)。根據(jù)研究人員的數(shù)據(jù)，Ahmad等人在2016年報(bào)道，PPARγ在PTEN缺陷型PCa小鼠模型中的過(guò)度表達(dá)不僅促進(jìn)了腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移形成，還與患者更差的生存結(jié)果相關(guān)，同時(shí)上調(diào)了脂肪代謝相關(guān)蛋白如FASN。相反，PPARγ的短暫敲低或暴露于PPARγ激動(dòng)劑GW9662、羅格列酮或吡格列酮可減少PCa腫瘤生長(zhǎng)，并在體外增加E-鈣粘蛋白的表達(dá)，同時(shí)在體內(nèi)減少腫瘤生長(zhǎng)。研究人員的研究結(jié)果表明，吡格列酮和類似的代謝抑制劑在新興的PCa治療策略中處于前沿地位。然而，進(jìn)一步深入和長(zhǎng)期的縱向研究對(duì)于完全闡明這些代謝抑制劑對(duì)PCa的發(fā)展和進(jìn)展以及患者生存的影響至關(guān)重要。

實(shí)驗(yàn)方法

         PPARG表達(dá)與PCa患者生存率關(guān)聯(lián)分析、GSEA、蛋白質(zhì)組學(xué)分析、代謝組學(xué)分析、WB、放射性示蹤劑攝取實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)和DNA定量實(shí)驗(yàn)、 細(xì)胞凋亡檢測(cè)、 細(xì)胞代謝分析、 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、異種移植實(shí)驗(yàn)、 免疫組化

參考文獻(xiàn)

         Atas E, Berchtold K, Schlederer M, Prodinger S, Sternberg F, Pucci P, Steel C, Matthews JD, James ER, Philippe C, Trachtová K, Moazzami AA, Artamonova N, Melchior F, Redmer T, Timelthaler G, Pohl EE, Turner SD, Heidegger I, Krueger M, Resch U, Kenner L. The anti-diabetic PPARγ agonist Pioglitazone inhibits cell proliferation and induces metabolic reprogramming in prostate cancer. Mol Cancer. 2025 May 5;24(1):134.