microRNA整套技術(shù)服務(wù)（靶基因功能驗證服務(wù)，報告基因載體，過表達載體，穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株等等）

1. microRNA靶點的預(yù)測

1. 獲得microRNA靶點序列

1. microRNA靶序列克隆

1. 陽性克隆鑒定。

1. 細胞轉(zhuǎn)染準備

1. 熒光素酶檢測

1. 突變實驗

1. 整理分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。

 MicroRNA功能學實驗

• 細胞增殖試驗

• 細胞凋亡試驗

• 細胞周期試驗

• 細胞侵襲試驗

• 細胞遷移試驗

服務(wù)流程：

構(gòu)建過表達microRNA載體以及對照載體或客戶提供人工合成寡核苷酸→轉(zhuǎn)染細胞系→qRT-PCR檢測目的MicroRNA前體的表達情況→分析目的MicroRNA與細胞增殖、細胞凋亡、細胞周期、細胞侵襲、細胞遷移之間的調(diào)控關(guān)系→出具書面報告，qRT-PCR分析的原始數(shù)據(jù)

客戶提供：

MicroRNA前體（Ambion公司）或mimic 與寡核苷酸（即對照前體或control mimic）及細胞系。

公司提供：

MicroRNA表達載體的質(zhì)粒、質(zhì)粒測序圖、qRT-PCR分析的原始數(shù)據(jù)、結(jié)果分析的書面報告。

 

miRNA表達檢測

        定量檢測組織或細胞樣本中的miRNA是功能研究的第一步，有助于人們進一步了解 miRNA與疾病發(fā)生及發(fā)展的關(guān)系，以便為疾病的早期診斷提供新的思路。本公司主要通過microRNA芯片、microRNA-Seq、microRNA PCR 芯片、實時定量PCR、原位雜交等多種方法檢測miRNA的表達情況。為您提供最優(yōu)質(zhì)的、全方位的技術(shù)服務(wù)。

1、microRNA芯片檢測服務(wù) http://www.biomart.cn/infosupply/7484330.htm

2、 microRNA PCR芯片檢測服務(wù) http://www.biomart.cn/infosupply/10966567.htm

3、microRNA-Seq檢測服務(wù)http://www.biomart.cn/infosupply/9632788.htm

4、microRNA定量PCR http://www.biomart.cn/infosupply/7484332.htm

miRNA芯片，microRNA-Seq數(shù)據(jù)深度發(fā)掘分析

a) 芯片，測序數(shù)據(jù)聚類分析

b) microRNA靶基因預(yù)測“TargetScanS”， “miRanda (miRBase)”，“miRGen”等數(shù)據(jù)庫

預(yù)測差異microRNA的所有靶基因。

c) 靶基因GO分析

根據(jù)Gene Ontology數(shù)據(jù)庫對靶基因進行功能顯著分析，從而篩選顯著性功能的靶基因。

d) 靶基因pathway分析

根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫對靶基因進行Pathway分類，并進行顯著性分析從而得到顯著性的Pathway分類。

e) 構(gòu)建的MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

通過構(gòu)建MicroRNA與基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，可以從中找出hub基因及hub microRNA.

f) microRNA 、靶基因、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

microRNA也會受到轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控造成表達差異，通過系統(tǒng)研究轉(zhuǎn)錄因子與基因間的調(diào)控關(guān)系，可以為尋找重要轉(zhuǎn)錄因子及重要基因提供線索。

g) microRNA啟動子分析及甲基化位點分析

當microRNA研究日趨火熱，越來越多的研究者開始關(guān)注microRNA本身甲基化變化。MicroRNA基因的甲基化變化也是造成microRNA表達差異的重要原因。